PCR基因擴(kuò)增儀應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少并遠(yuǎn)離水源(如靠近水池、水管等)的地方,室內(nèi)應(yīng)通風(fēng)良好,無腐蝕性氣體或強(qiáng)磁場(chǎng)干擾。不要將儀器安放在潮濕的或灰塵較多的地方。儀器上的開口都是為了通風(fēng)而設(shè),為了避免溫度過熱,一定不要阻塞或覆蓋這些通風(fēng)孔。單臺(tái)儀器使用時(shí),儀器的通風(fēng)孔與物體的距離應(yīng)不小于50cm。另外不要在松軟的表面上使用儀器,否則可能會(huì)阻塞儀器底部的進(jìn)風(fēng)孔。溫度過高會(huì)影響儀器的性能或引起故障。不要在陽光直射的地方使用本儀器,并要遠(yuǎn)離暖氣、爐子以及其它一切熱源。長時(shí)間不使用本儀器時(shí),應(yīng)拔下電源插頭,并用軟布或塑料紙覆蓋儀器以防止灰塵進(jìn)入。
加熱模塊:上孔與孔之間的溫度一致性對(duì)于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗(yàn)證試劑盒進(jìn)行檢測(cè),溫度驗(yàn)證檢測(cè)通??捎糜冢?/div>
在等溫模式下相對(duì)于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性;
在溫度轉(zhuǎn)換后相對(duì)于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性;
熱蓋溫度的準(zhǔn)確性。
引物退火溫度控制:梯度溫度控制是PCR儀一項(xiàng)有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實(shí)現(xiàn)變化的溫度,通過每列之間≥2°C的溫度升降,可同時(shí)對(duì)于不同溫度進(jìn)行測(cè)試以獲取引物退火溫度。理論上,梯度可在模塊之間實(shí)現(xiàn)線性的溫度。
PCR基因擴(kuò)增儀對(duì)于樣品溫度控制的能力對(duì)于PCR結(jié)果的準(zhǔn)確性十分重要。儀器特異性的參數(shù)如升降溫速度,維持時(shí)間以及算法對(duì)于預(yù)測(cè)樣品溫度是關(guān)鍵。升降溫速度意味著在一定時(shí)間內(nèi)發(fā)生的PCR步驟之間的溫度變化。由于熱量從模塊傳輸至樣品需要一定的時(shí)間,樣品實(shí)際的升降溫速度會(huì)較慢。因此,對(duì)于變溫速度的定義需要進(jìn)行區(qū)分和了解。